冻存复苏工艺对免疫细胞质量的影响及质控标准的制定

摘要

近年来，以嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）、肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）及自然杀伤细胞（NK）为代表的免疫细胞治疗在恶性肿瘤及自身免疫性疾病领域取得了突破性进展。然而，免疫细胞产品从制备端到临床使用端往往存在时空分离，冷冻保存与复苏工艺成为连接生产与临床应用的必经桥梁。冻存复苏过程中的冰晶形成、渗透压休克、氧化应激及冷冻保护剂毒性等因素多重刺激会持续损伤细胞，影响细胞治疗的临床效果。梳理细胞冻融全过程的热力学基础机制，剖析降温速率、冻存保护剂等关键工艺参数对细胞产生损伤的多重作用途径，基于质量源于设计（QbD）思路搭建细胞冻存复苏全流程质量管控框架，制定一套标准化工艺验证方案，以此解决规模化生产中不同批次细胞品质参差不齐、细胞活性与功能持续衰减等产业化痛点。